克银胶囊中丹皮酚的含量测定。克银胶囊中丹皮酚的含量测定 朱昆 1，汪旭 2,李晓丽 1※ 【摘 要】摘要：本试验建立了测定克银胶囊中丹皮酚含量的高效液相色谱 (HPLC)方法。色谱柱：十八烷基键合硅胶(250mm×4.6mm，5
克银胶囊中丹皮酚的含量测定 朱昆 1，汪旭 2,李晓丽 1※ 【摘 要】摘要：本试验建立了测定克银胶囊中丹皮酚含量的高效液相色谱 (HPLC)方法。色谱柱：十八烷基键合硅胶(250mm×4.6mm，5μm)；流动相： 甲醇-水(50∶50)；流速：1.0mL/min；检测波长：274nm。实验结果表明， 丹 皮 酚 的 线) ， 平 均 加 样 回 收 率 为 99.84%(n=9，RSD=1.15%)。本实验所建立的测定克银胶囊中丹皮酚的 HPLC 方法简便、快捷、准确。 【期刊名称】特产研究 【年(卷),期】2016(038)001 【总页数】3 【关键词】高效液相色谱；克银胶囊；丹皮酚 克银胶囊是吉林省军区门诊部研制的院内制剂，主要适应症为寻常型银屑病。 该制剂处方由牡丹皮、秦皮、金银花、生地黄等 16 味中药组成，具有养阴生 津、清热解毒、透疹止痒、化瘀活血的功效。在该制剂中，牡丹皮为君药，丹 皮酚是牡丹皮中主要成分。本研究拟通过高效液相色谱(HPLC)法对克银胶囊中 丹皮酚的含量进行测定，为克银胶囊的质量控制提供可靠依据。 1 仪器与试药 LC-2010AHT 高效液相色谱仪(日本岛津公司)；KQ-3200E 数控超声波处理器 (昆山市超声仪器有限公司)。 丹皮酚对照品(中国食品药品检定研究院，批号：11)，克银胶囊 (规格：240mL/袋，批号：20130801、20130802、20130803)，水为重蒸水， 甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 色谱柱：十八烷基键合硅胶色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：甲醇水(50∶50)；柱温：26℃；流速：1.0mL/min；理论板数按丹皮酚(C9H10O3) 峰计算应不低于 5000；检测波长：274nm。 2.2 供试品溶液的配制 精密称取 1g 供试品置 50mL 容量瓶中，精密量取 50mL 95%乙醇置容量瓶中， 称重，密封处理后置超声波处理器中，超声 20min 后静置，室温风干表面水分， 称重，用 95%乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，即为供试品溶液。 2.3 对照品溶液的配制 精密称取适量丹皮酚的对照品溶液置容量瓶中，取适量 95%乙醇溶液，稀释成 20μg/mL 的对照品溶液。 2.4 阴性对照溶液的配制 按克银胶囊的制备工艺制备不含牡丹皮的阴性成品，按供试品溶液的配制方法 配制成阴性对照品溶液。 2.5 阴性干扰实验 将配制好的阴性对照溶液、供试品、对照品，按“2.1”项色谱条件分别进样 10μL。阴性对照液在与丹皮酚对照品相应的位置上未出现干扰峰(约 14min)， 这说明在处方中其它味药不影响结果的测定(图 1)。 2.6 线性关系考察 精密称取适量丹皮酚对照品，取适量 95%乙醇，配制成 0.0203mg/mL 的溶液。 精密吸取对照品溶液 4μL、7μL、10μL、13μL、16μL、19μL，分别进样， HPLC 法测定。横坐标为进样量，纵坐标为峰面积值，制定丹皮酚标准曲线， 回 归 方 程 为 y=5×106x+809.2 ， r=1 。 结 果 表 明 ， 丹 皮 酚 进 样 量 在 0.0812μg～0.3857μg 范围内，峰面积与进样量的线 稳定性实验 取放置 4h、8h、12h、16h、24h 的供试品溶液，分别测定其丹皮酚含量，考 察其稳定性。结果显示，RSD 为 0.11%，表明供试品溶液稳定性良好，在 24h 内含量稳定。 2.8 精密度考察 取同一对照品溶液，每次进样 10μL，6 次重复，计算对照品溶液的相对标准偏 差，RSD 为 0.08%，表明精密度良好。 2.9 重复性实验 取批号为 20130801 的克银胶囊，依法制备供试品溶液，测定丹皮酚含量，结 果显示，平均含量为 1.2321mg/g，RSD 为 1.24%，表明该方法重复性良好。 2.10 加样回收率实验 精 密 称 取 含 量 已 知 的 克 银 胶 囊 内 容 物 ( 批 号 20130801 ， 丹 皮 酚 含 量 为 1.2321mg/g)0.4g、0.5g、0.6g，每个重量各 3 份，分别置于 9 个锥形瓶中， 编号待用。用 95%乙醇溶解适量丹皮酚对照品，取 5mL 该溶液，加入各容量 瓶中，再精密加入 95%乙醇 45mL，密闭，称量。超声处理 20min，放冷，称 重，用 95%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，依法测定。分别计算回收率， 结果见表 1。 由表 1 可知，本法加样回收率试验准确可靠。 2.11 样品含量测定 取 3 个批次的克银胶囊，每个批次各 2 份，按供试品溶液制备方法制备，测定 样品中丹皮酚的含量，结果见表 2。 3 讨论 流动相选择中，本试验曾选用甲醇-水(45∶55)[1]、乙腈-0.5%磷酸二氢钾溶液 (32∶68)和乙腈-水(1∶1)为流动相，但是丹皮酚色谱峰与本制剂中其它药味的 色谱峰的分离效果较差，无法有效测定丹皮酚含量，故通过试验摸索，使用甲 醇-水(50∶50)为流动相，由图谱可知，丹皮酚与其他各成分分离良好，宜作为 克银胶囊中丹皮酚含量测定的流动相。 牡丹皮为克银胶囊的主药，且牡丹皮中丹皮酚的含量较高，将其作为含量测定 指标，可以有效控制克银胶囊质量。因此，本品以丹皮酚的含量作为含量测定 的指标是合理的。 参考文献 [1]国家药典委员会.中华人民共和国药典 :一部 [K].北京:中国医药科技出版 社,2010:160-161. ※通讯作者：李晓丽，E-mail:.
