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克柔念珠菌的标记及抗克柔念珠菌对策

放大字体  缩小字体 发布日期:2020-11-12 04:26:36    浏览次数:12
导读

  克柔念珠菌(Candida krusei,同物异名Pichia kudriavzevii、Issatchenkia orientalis)是一种全球范围内临床重要的致病性真菌。克柔念珠菌可引起多种类型的感染,包括皮肤感染、角膜炎、念珠菌血症等。该种病原对临床常用的抗真菌药物氟康唑 (Fluconazole)具有天然耐药性。  目前,用于克柔念珠菌主要分子标记仍然是IT

  克柔念珠菌(Candida krusei,同物异名Pichia kudriavzevii、Issatchenkia orientalis)是一种全球范围内临床重要的致病性真菌。克柔念珠菌可引起多种类型的感染,包括皮肤感染、角膜炎、念珠菌血症等。该种病原对临床常用的抗真菌药物氟康唑 (Fluconazole)具有天然耐药性。

  目前,用于克柔念珠菌主要分子标记仍然是ITS、beta-tublin、Calmodulin等,但这些序列的种内多态性较低,无法满足克柔念珠菌的分子溯源、群体遗传学和分子流行病学研究等工作的需要。

  CN0.1提供一种克柔念珠菌STR分子标记,所述STR分子标记为SEQ IDNO:1-40所示序列中的任一个。本发明还提供克柔念珠菌STR分子标记组合,所述STR分子标记组合为权利要求1 所述STR分子标记中的任意两个或多个组合。本发明还提供用于检测上述STR分子标记的引物。本发明还提供用于检测上述STR分子标记的试剂盒。本发明还提供STR分子标记单独或组合使用在克柔念珠菌的分子分型、分子溯源、 群体遗传学和系统进化分析中的应用。

  (2)合成SEQ ID NO:41-120所示的引物,并使用荧光染料对正向引物5端进行标记,获得荧光标记的引物组;

  (3)以步骤(1)提取的基因组DNA为模板,利用步骤(2)荧光标记的引物组进行PCR 扩增;

  本发明的有益效果是:本发明首次提供一套克柔念珠菌的微卫星位点(STR分子标记)组合,其中共包括40个高度多态的微卫星位点(SEQ ID NO:1-40)。同时,提供了一套能 够高效扩增克柔念珠菌群体的特导性引物(SEQ ID NO:41-120)和检测条件。这一套克柔念珠菌的微卫星标记,不仅可以用于球形孢子丝菌的遗传背景分析和分子溯源,同时也可应用于球形孢子丝菌的分子流行病学、群体遗传学和系统进化分析。

  近 20 年来,伴随药敏试验方式的持续完善,抗真菌药物的敏感性结果的真实性更为可信。但也因患者免疫状态的不同,基础疾病的差异,药物间相互影响,抗真菌药物剂量高低区别,疗程长短和血药浓度水平高低的不同,和别种感染因素的影响,如脓肿引流状况,插入导管是否去除等因素造成药敏试验结果与临床治疗情况不符。这就需要我们判断真菌药敏结果要慎重,在将其他会对治疗效果产生不利影响的因素排除后,将最初致感染菌提取出来,同时和治疗失败后分离出的真菌的 MIC进行比较,若其 MIC 显著提升,则显示其耐药性提高。

  CGA 是分布于内分泌细胞嗜铬颗粒和神经细胞中的一种可溶性蛋白。经过对 CGA 中不同衍生片段的抗菌活性进行检测,结果提示 CGAN 端的CGA-46 显示出极强的抗线 能对进行测试的念珠菌属的生长进行抑制,在这之中,克柔念珠菌的敏感性最强。利用暂时对磷脂膜的稳定性进行去除,造成线粒体功能障碍,同时抑制 DNA 合成,CGA-N46 被认为是抗克柔念珠菌感染的最新化合物。

  AgNPs 指利用环保方式,将半胱氨酸视作还原剂合成产生的。在某些学者的认知中,AgNP 可被视为开发新型抗真菌剂的最新化合物,它在成纤维细胞中具有最低的细胞毒性,同时针对具有抗常规真菌化合物抗性的念珠菌属有较强致死性。这就是此类药物的新药研究的潜力体现。

  Tan等通过深刻研究,显示 CM-壳聚糖不论是针对单个和混合物中生物膜的非白色念珠菌,均具有显著抑制作用,常见菌属包括了热带假丝酵母,滑假丝酵母,还包括了克柔假丝酵母以及光滑念珠菌。所以 CM-壳聚糖不单单可以起到减低念珠菌细胞代谢活性的作用,还可以刺激生物膜的建立和发展,在进行新药物研究中极具价值。

  艾沙康唑有可预测的和与剂量成正比的药动学,现已完成Ⅲ期临床试验,一般被用来治疗侵袭性念珠菌病、念珠菌血症,还可被用于治疗侵袭性曲霉病和较为少见的曲霉感染。在艾莎康唑的分子结构式中,其侧链具有很高的线 蛋白亲和力,造成其抗真菌谱范围更广,甚至将对别种唑类抗真菌药所耐受的线 阿巴康唑

  阿巴康唑是一种生物利用度高、抗真菌活性强的口服制剂,针对足廯已完成Ⅰ期试验评价,用于脚趾甲真菌病治疗已完成Ⅱ期临床试验。

  福司氟康唑是氟康唑的磷酸酯前体药物,是以氟康唑为起始原料通过两部合成。福司氟康唑静脉给药 2-3d 即可达到有效血药浓度。安全性好,不良反应小。

  两性霉素 B 脂质体是两性霉素 B 的一种新剂型,发挥其最强杀菌效能的同时降低其毒副作用。20 世纪 90 年代,研发了 3 种不同的两性霉素 B 的脂类复合体,分别是两性霉素 B 脂质体、两性霉素B 脂质复合体和两性霉素 B 胶状分散体。制霉菌素脂质体是游离制霉菌素包裹在多层脂质中,保留其抗菌活性的同时降低其肾毒性。灰黄霉素的卵磷脂脂质体也于 20 世纪 90 年代研发,其肝毒性大大低于常规灰黄霉素口服剂。

  中草药因其所具备的来源多、抗菌谱广、毒性小、耐药性产生率低等优势引起了多方关注。有研究提示,大蒜、地锦草、黄芩、鱼腥草等都具备较高的抗真菌性。还有研究对这一轮点进行了进一步肯定,研究显示大蒜素可有效抑制生物膜的黏附和胞外多糖的产生;苦参碱则能够显著阻碍白念珠菌的黏附和菌丝生长;黄芪苷可抑制真菌DNA 的合成而达到抗菌作用。

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关键词: 克银颗粒
(文/小编)
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